პროდუქტები

ფერმენტული აქტივობის შესაცვლელად ერთდროული მუტაციების ეფექტის გაერთიანება არ არის ადვილად პროგნოზირებადი, რადგან ეს ეფექტები ყოველთვის არ არის ადიტიური ხაზოვანი გზით.აქედან გამომდინარე, ამინომჟავების ნარჩენების ერთდროული მუტაციების ეფექტების დახასიათებას, რომლებიც აკავშირებს სუბსტრატს, შეუძლია მნიშვნელოვანი წვლილი შეიტანოს ფერმენტების სუბსტრატის სპეციფიკის გაგებაში.ბეტა-გლიკოზიდაზაში Spodoptera frugiperda (Sfbetagly) ორივე ნარჩენი Q39 და E451 ურთიერთქმედებენ სუბსტრატთან და ეს აუცილებელია სუბსტრატის სპეციფიკის განსაზღვრისათვის.Sfbetagly-ის ორმაგი მუტანტები (A451E39, S451E39 და S451N39) მომზადდა ადგილზე მიმართული მუტაგენეზით, გამოხატული ბაქტერიებში და გაწმენდილი აფინური ქრომატოგრაფიის გამოყენებით.ეს ფერმენტები ხასიათდებოდა პ-ნიტროფენილ ბეტა-გალაქტოზიდისა და პ-ნიტროფენილ ბეტა-ფუკოზიდის, როგორც სუბსტრატების გამოყენებით.K კატა/კმ თანაფარდობა Sfbetagly-ის ერთ და ორმაგ მუტანტებისთვის, რომლებიც შეიცავს უბნის მიმართულ მუტაციებს Q39 და E451 პოზიციებზე, გამოყენებული იყო იმის საჩვენებლად, რომ ეფექტი ორმაგი მუტაციების ESორმაგი ხანჯლის (ფერმენტ-გარდამავალი მდგომარეობის კომპლექსი) თავისუფალ ენერგიაზე (Gdouble). daggerxy) არ არის ერთჯერადი მუტაციების შედეგად მიღებული ეფექტების ჯამი (Gdouble daggerx და Gdouble daggery).ეს განსხვავება Gdouble Dagger-ში მიუთითებს, რომ ცალკეული მუტაციების ეფექტები ნაწილობრივ ემთხვევა ერთმანეთს.აქედან გამომდინარე, ეს საერთო ეფექტი მხოლოდ ერთხელ ითვლება Gdouble daggerxy-ში.ბეტა-გლიკოზიდაზების კრისტალოგრაფიული მონაცემები ცხადყოფს ბიდენტატის წყალბადური ბმის არსებობას, რომელიც მოიცავს Q39 და E451 ნარჩენებს და სუბსტრატის იგივე ჰიდროქსილის ჯგუფს.აქედან გამომდინარე, როგორც თერმოდინამიკური, ასევე კრისტალოგრაფიული მონაცემები ვარაუდობენ, რომ ნარჩენები Q39 და E451 ახდენენ ორმხრივ გავლენას სუბსტრატთან მათ შესაბამის ურთიერთქმედებებზე.