პროდუქტები

ერთ-ერთი ფაქტორი, რომელიც ხელს უშლის რეგენერაციული მედიცინის კლინიკურ გამოყენებას დეგენერაციული ხრტილის დაავადებებში, არის უჯრედების შესაფერისი წყარო.ქონდროციტები, ხრტილის ერთადერთი უჯრედული ტიპი, რომელიც იზრდება in vitro კულტურის პირობებში, უჯრედების რიცხვის გაფართოების მიზნით, კარგავს თავის ფენოტიპს და ჰიალინის ხრტილოვანი ქსოვილის გენერირების უნარს.ამ კვლევაში ჩვენ განვსაზღვრავთ, რომ შრატისა და ზრდის ფაქტორებისგან თავისუფალი სამგანზომილებიანი (3D) კულტურის სისტემა აღადგენს გავლილი ქონდროციტების უნარს, შექმნან ხრტილოვანი ქსოვილი in vitro, პროცესი, რომელიც მოიცავს sox9. მსხვილფეხა რქოსანი ქონდროციტები ორჯერ იქნა გადაყვანილი საშუალებას იძლევა უჯრედების რაოდენობის გაფართოება (P2) და კულტივირება მაღალი სიმკვრივით 3D კოლაგენის ტიპის II-დაფარულ მემბრანებზე მაღალი გლუკოზის შემცველობის მედიაში, რომელიც დამატებულია ინსულინით და დექსამეტაზონით (SF3D).უჯრედები ხასიათდება მონოშრიანი გაფართოებისა და 3D კულტურის შემდეგ ნაკადის ციტომეტრიით, გენის ექსპრესიით და ჰისტოლოგიით.დახასიათებული იყო ადრეული ცვლილებები სასიგნალო ტრანსდუქციის ბილიკებში რედიფერენციაციის იონების დროს. P2 უჯრედებმა აჩვენეს წინამორბედის მსგავსი ანტიგენის პროფილი 99% CD44(+) და 40% CD105(+) და გენის ექსპრესიის პროფილი, რომელიც მიუთითებს ინტერზონის უჯრედებზე.P2 SF3D-ში გამოხატავდა ქონდროგენურ გენებს და დაგროვილ უჯრედგარე მატრიქსს.ინსულინის რეცეპტორის (IR) დაქვეითება HNMPA-(AM3) ან PI-3/AKT კინაზას გზაზე (გააქტიურებულია ინსულინის მკურნალობით) Wortmannin-ით აფერხებს კოლაგენის სინთეზს.HNMPA-(AM3) ამცირებს Col2, Col11 და IR გენების, ასევე Sox6 და -9 ექსპრესიას.HNMPA-(AM3) დამუშავებული უჯრედების ერთობლივი იმუნოპრეციპიტაციისა და ქრომატინის იმუნოპრეციპიტაციის ანალიზმა აჩვენა Sox6 და Med12 კოაქტივატორების შეკავშირება Sox9-თან, მაგრამ შემცირდა Sox9-Col2a1 შეკავშირება. ჩვენ აღვწერთ კულტურის ახალ მეთოდს, რომელიც საშუალებას იძლევა გაზარდოს ქონდროციტების რაოდენობა და ხელს უწყობს ჰიალინის მსგავსი ხრტილოვანი ქსოვილის ფორმირება ნაწილობრივ ინსულინის შუამავლობით Sox9-Col2a1 შეკავშირებით.ამ მიდგომით წარმოქმნილი ქსოვილის ვარგისიანობა სახსრის შეკეთებაში გამოსაყენებლად საჭიროებს გამოკვლევას in vivo.