პროდუქტები

ბირთვული პროტეინის Lamin-A-ს მუტანტური ფორმის ბირთვული დაგროვება, სახელწოდებით Progerin (PG) ან Lamin AΔ50, ხდება Hutchinson-Gilford Progeria Syndrome (HGPS) ან პროგერიაში, დაბერების დაჩქარებული დაავადება.ამ გენეტიკური აშლილობის ერთ-ერთი მთავარი სიმპტომია კანქვეშა ცხიმის დაკარგვა დრამატული ლიპოდისტროფიის გამო. ჩვენ სტაბილურად ვიწვევდით ადამიანის PG და GFP -მწვანე ფლუორესცენტური პროტეინის- ექსპრესიას 3T3L1 უჯრედებში ლენტივირუსული სისტემის გამოყენებით PG გამოხატვის ეფექტი ამ უჯრედული ხაზის დიფერენციაციის შესაძლებლობებში, ერთ-ერთი ყველაზე ხშირად გამოყენებული ადიპოგენური მოდელი.რაოდენობრივი პროტეომიკა (iTRAQ) გაკეთდა PG დაგროვების ეფექტის შესასწავლად.რამდენიმე მოდულირებული ცილა დადასტურდა იმუნობლოტირებით და რეალურ დროში PCR-ით.მიტოქონდრიული ფუნქცია გაანალიზებული იყო ა) მიტოქონდრიული ბაზალური აქტივობის, ბ) სუპეროქსიდის ანიონის წარმოქმნის და გ) რესპირატორული ჯაჭვის სხვადასხვა კომპლექსის ინდივიდუალური ეფექტურობის გაზომვით. ჩვენ აღმოვაჩინეთ, რომ PG-ს გადაჭარბებული გამოხატვა ლენტივი ral გენის მიწოდებით იწვევს პროლიფერაციის სიჩქარის შემცირება და ადიპოგენური შესაძლებლობების დეფექტები კონტროლთან შედარებით.პროტეომიკის რაოდენობრივმა ანალიზმა აჩვენა 181 პროტეინი მნიშვნელოვნად (p<0.05) მოდულირებული PG-გამომსახველ პრეადიპოციტებში.მიტოქონდრიული ფუნქცია დარღვეულია PG-ის გამოხატულ უჯრედებში.კერძოდ, ჩვენ აღმოვაჩინეთ I კომპლექსის აქტივობის ზრდა და სუპეროქსიდის ანიონის ჭარბი წარმოება.რეაქტიული ჟანგბადის სახეობების (ROS) გამწმენდი აგენტებით ინკუბაცია იწვევს აუტოფაგიური პროტეოლიზის შემცირებას, როგორც ეს გამოვლინდა LC3-II/LC3-I თანაფარდობით. PG გამოხატვა 3T3L1 უჯრედებში ხელს უწყობს ცვლილებებს რამდენიმე ბიოლოგიურ პროცესში, მათ შორის ციტოჩონჩხის სტრუქტურაში, ლიპიდურ მეტაბოლიზმში, კალციუმში. რეგულირება, ტრანსლაცია, ცილების დაკეცვა და ენერგიის გამომუშავება მიტოქონდრიით.ჩვენი მონაცემები აძლიერებს ROS-ის დაგროვების წვლილს ნაადრევი დაბერების ფენოტიპში და ადგენს კავშირს მიტოქონდრიულ დისფუნქციასა და პროტეოსტაზის დაკარგვას შორის HGPS-ში.