ONPG CAS:369-07-3 98.0% მინ. თეთრიდან გამორთვამდე -თეთრი ფხვნილი
კატალოგის ნომერი | XD90006 |
CAS | 369-07-3 |
Პროდუქტის სახელი | ONPG (2-ნიტროფენილ-ბეტა-D-გალაქტოპირანოზიდი) |
Მოლეკულური ფორმულა | C12H15NO8 |
Მოლეკულური წონა | 301.25 |
შენახვის დეტალები | 2-დან 8 °C-მდე |
ჰარმონიზებული სატარიფო კოდექსი | 29400000 |
პროდუქტის სპეციფიკაცია
სისუფთავე (HPLC) | მინ.98.0% |
გარეგნობა | თეთრიდან მოთეთრო-თეთრი ფხვნილი |
გამოსავალი(1% წყალში) | გამჭვირვალე, უფერო ოდნავ მოყვითალო ხსნარი |
Წყლის შემცველობა(კარლ ფიშერი) | მაქს.0.5% |
სპეციფიური ოპტიკური ბრუნვა [α]D20(c=1, H2O) | - 65.0 ° C-დან -73.0 ° C-მდე |
დისკუსია ONPG ტესტზე (β-გალაქტოზიდაზას ტესტი)
ბოლო დროს ხშირად ჩნდება კითხვები: 1. რატომ შეიძლება გამოვიყენოთ ONPG ტესტი დაგვიანებული ლაქტოზის დუღილის გასარჩევად?2. რატომ წერია ეროვნულ სტანდარტში, რომ ONPG ტესტისთვის აუცილებელია 3% ნატრიუმის ქლორიდის ტრისაქარიდ რკინის (ან ტრისაქარიდული რკინის) გამოყენება?3. Vibrio parahaemolyticus-ისთვის OPNG ტესტის ჩატარებისას რატომ უნდა დაემატოს ტოლუენი სტანდარტის მიხედვით წვეთობრივად?რა ფუნქცია აქვს?
ჩვენმა კომპანიამ განიხილა ბევრი ინფორმაცია, შეაჯამა და გაგიზიარათ ქვემოთ:
პრინციპი: ONPG-ის ჩინური სახელია ო-ნიტრობენზოლი-β-D-გალაქტოპირანოზიდი.ONPG შეიძლება ჰიდროლიზდეს გალაქტოზაში და ყვითელ ო-ნიტროფენოლში (ONP) β-გალაქტოზიდაზას მიერ, ამიტომ β-გალაქტოზიდაზას აქტივობა შეიძლება გამოვლინდეს კულტურის საშუალების ფერის ცვლილებით.
ლაქტოზა არის შაქარი, რომელიც მიკროორგანიზმების უმეტესობას სჭირდება.მის მეტაბოლიზმს ორი ფერმენტი სჭირდება, ერთი არის უჯრედის პერმეაზა, ლაქტოზა უჯრედებში პერმეაზას მოქმედებით ხვდება;მეორე არის β-გალაქტოზიდაზა, რომელიც ჰიდროლიზებს ლაქტოზას გალაქტოზაში.ლაქტოზა და გლუკოზა.β-გალაქტოზიდაზას ასევე შეუძლია უშუალოდ იმოქმედოს ONPG-ზე, რათა გალაქტოზასა და ყვითელ ო-ნიტროფენოლში (ONP) გადაიზარდოს.ეს შეიძლება გაკეთდეს 24 საათში, თუნდაც ლაქტოზას დაგვიანებული ფერმენტებით.მაშასადამე, იგი ხსნის დაკვირვების შედეგებს აგარის დახრილიდან 1 კულტურის აკრეფის და მისი სრულ წრეში 36°C ტემპერატურაზე 1-3 სთ და 24 სთ ინოკულაციისას.თუ β-გალაქტოზიდაზა წარმოიქმნება, ის 1-3 სთ-ში გაყვითლდება, თუ ასეთი ფერმენტი არ არის, ფერს 24 სთ-ში არ იცვლის.
ზემოაღნიშნული ორი ფერმენტის მიხედვით მიკროორგანიზმები შეიძლება დაიყოს შემდეგ კატეგორიებად:
1 ლაქტოზა-დუღილი (18-24 საათი) ბაქტერია პერმეაზასთან და β-გალაქტოზიდაზასთან P + G +;
2 დაგვიანებული ლაქტოზას ფერმენტატორი (24 საათზე მეტ ხანს გრძელდება) პერმეაზის ნაკლებობით, მაგრამ ფლობენ გალაქტოზიდაზას: P-G+.
3 არალაქტოზური ფერმენტატორი, რომელსაც აკლია როგორც პერმეაზა, ასევე გალაქტოზიდაზა: P-G-.
ONPG ტესტი შეიძლება გამოყენებულ იქნას ლაქტოზა-დაყოვნების დუღილის ბაქტერიებისგან (P-G+) არაფერმენტირებული ლაქტოზას ბაქტერიებისგან (PG-), როგორიცაა:
1 განასხვავეთ გვიანი ლაქტოზას ფერმენტატორები (P-G+) არალაქტოზის ფერმენტერებისგან (P-G-).
(a) Citrobacter (+) და Salmonella arizonae (+) Salmonella-დან (-).
(ბ) Escherichia coli (+) Shigella sonnei-დან (-).
რატომ ჩატარდა ONPG ანალიზი ღამის კულტურის გამოყენებით 3% ნატრიუმის ქლორიდის რკინის ტრისაქარიდზე (რკინის ტრისაქარიდზე)?ჩვენმა კომპანიამ ბევრი ინფორმაცია მიიღო, მაგრამ მკაფიო განცხადება არ არსებობს.მხოლოდ FDA-ს ვებსაიტზე წერია, რომ "დაანოკულაცია ჩაატარეთ შესამოწმებელი კულტურები სამმაგი შაქრის რკინის აგარის დახრილებზე და ინკუბაცია 18 საათის განმავლობაში 37°C-ზე (ან სხვა შესაბამის ტემპერატურაზე, თუ საჭიროა). ასევე შეიძლება გამოყენებულ იქნას ლაქტოზას %“.ნიშნავს: საცდელი ბაქტერია ჩანერგილი იქნა ტრისაქარიდული რკინის გარემოზე და კულტივირებული იყო 37°C-ზე 18 საათის განმავლობაში.ასევე მისაღებია მკვებავი აგარის დახრილი (ან სხვა) საშუალება, რომელიც შეიცავს 1% ლაქტოზას.აქედან გამომდინარე, ვარაუდობენ, რომ რკინის ტრისაქარიდული გარემო შეიცავს ლაქტოზას.ღამის ზრდის შემდეგ, ბაქტერიებმა გამოიმუშავეს კარგი აქტიური β-გალაქტოზიდაზა.ასეთი ბაქტერიების გამოყენებით ONPG შეიძლება უფრო სწრაფად დაიშალა β-გალაქტოზიდაზას მიერ.ექსპერიმენტული ფენომენი უფრო სწრაფად და უკეთ ვლინდება.გარდა ამისა, ტოლუოლის წვეთობრივად დამატება და წყლის აბაზანა 5 წუთის განმავლობაში, ეს ყველაფერი არის β-გალაქტოზიდაზას სრულად განთავისუფლების მიზნით.