პროდუქტები

LecA (PA-IL) არის ციტოტოქსიური ლექტინი და ადჰეზინი, რომელიც წარმოიქმნება Pseudomonas aeruginosa-ს მიერ, რომელიც აკავშირებს ჰიდროფობიურ გალაქტოზიდებს მაღალი სპეციფიკურობითა და აფინურობით.lecA-egfp მთარგმნელობითი შერწყმისა და ბიოფილმის უჯრედგარე მატრიქსის იმუნობლოტის ანალიზის გამოყენებით, ჩვენ ვაჩვენებთ, რომ lecA გამოხატულია ბიოფილმში გაზრდილ უჯრედებში.როგორც პოლისტიროლის, ასევე უჟანგავი ფოლადის სტატიკური ბიოფილმის ანალიზში, ბიოფილმის სიღრმე და ზედაპირის დაფარვა შემცირდა lecA-ს მუტაციით და გაძლიერდა LecA-ს ზედმეტად წარმომქმნელ შტამში PAO-P47.ბიოფილმის ზედაპირის დაფარვა ძირითადი შტამით, PAO-P47, მაგრამ არა lecA მუტანტით ფოლადის კუპონებზე, ასევე დათრგუნული იყო ზრდით იზოპროპილ-ბე-D-თიოგალაქტოზიდის (IPTG) ან პ-ნიტროფენილ-ალფა-D-გალაქტოზიდის თანდასწრებით. NPG).გარდა ამისა, ამ ჰიდროფობიური გალაქტოზიდების არარსებობის შემთხვევაში წარმოქმნილი სექსუალური ველური ტიპის ბიოფილმები შეიძლება დაიფანტოს IPTG-ის დამატებით.ამის საპირისპიროდ, პ-ნიტროფენილ-ალფა-L-ფუკოზის (NPF) დამატებას, რომელსაც აქვს მაღალი აფინურობა P. aeruginosa LecB (PA-IIL) lecti n-ის მიმართ, არ ქონდა გავლენა ბიოფილმის ფორმირებაზე ან დისპერსიაზე.P. aeruginosa PAO1-ის პლანქტონურ ზრდაზე გავლენას არ ახდენდა IPTG, NPG ან NPF-ის არსებობა, არც შტამს შეეძლო ამ შაქრების ნახშირბადის წყაროდ გამოყენება, რაც მიუთითებს იმაზე, რომ დაკვირვებული ზემოქმედება ბიოფილმის ფორმირებაზე განპირობებული იყო LecA-ლიგანდის კონკურენტული ინჰიბიციით. სავალდებულო.მსგავსი შედეგები ასევე იქნა მიღებული ბიოფილმებისთვის, რომლებიც გაიზარდა დინამიური ნაკადის პირობებში ფოლადის კუპონებზე, რაც მიუთითებს იმაზე, რომ LecA ხელს უწყობს P. aeruginosa ბიოფილმის არქიტექტურას სხვადასხვა გარემო პირობებში.

ალფა-L-ფუკოზიდაზა (EC 3.2.1.51), რომელსაც შეუძლია გაათავისუფლოს ტ-ფუკოსილის ნარჩენი ქსილოგლუკანის ოლიგოსაქარიდების გვერდითი ჯაჭვიდან, აღმოჩენილია არაბიდოპსისის მცენარეების ფოთლებში.გარდა ამისა, ალფა-L-ფუკოზიდაზა სუბსტრატის მსგავსი სპეციფიკის მქონე კომბოსტოს (Brassica oleracea) ფოთლებისგან გაწმენდილი იქნა SDS-PAGE-ზე ერთი ზოლის გამოსაყვანად.ორი პეპტიდური თანმიმდევრობა იქნა მიღებული ამ ცილის ზოლიდან და ისინი გამოიყენეს არაბიდოპსისის გენის იდენტიფიცირებისთვის, რომელიც კოდირებს ალფა-ფუკოზიდაზას, რომელსაც ჩვენ გვთავაზობს ვუწოდოთ AtFXG1.გარდა ამისა, ასევე ნაპოვნია Arabidopsis გენი ცნობილ ალფა-L-ფუკოზიდაზებთან ჰომოლოგიით და ჩვენ შევთავაზეთ მისი დასახელება AtFUC1.ორივე AtFXG1 და ATFUC1 ჰეტეროლოგიურად იყო გამოხატული Pichia pastoris უჯრედებში და ალფა-L-ფუკოზიდაზას აქტივობა გამოიყოფა კულტურის გარემოში.AtFXG1-ით კოდირებული ალფა-L-ფუკოზიდაზა აქტიური იყო ქსილოგლუკანის XXFG-ის ოლიგოსაქარიდების წინააღმდეგ, ასევე 2'-ფუკოსილ-ლაქტიტოლის წინააღმდეგ, მაგრამ არა პ-ნიტროფენილ-ალფა-L-ფუკოპირანოზიდის მიმართ.თუმცა, ჰეტეროლოგიურად გამოხატული AtFUC1 აქტიური იყო მხოლოდ 2'-ფუკოსილ-ლაქტიტოლის მიმართ.ამრიგად, პირველი დაკავშირებული უნდა იყოს ქსილოგლუკანის მეტაბოლიზმთან.