პროდუქტები

ორბიტალური ფიბრობლასტების დიფერენცირება მომწიფებულ ადიპოციტებად და შემდგომ ცხიმოვანი ქსოვილის დაგროვება ნაჩვენებია გრეივსის ორბიტოპათიის (GO) პროგრესირებაში.აუტოფაგია ჩართულია ადიპოგენეზში, მაგრამ ცოტა რამ არის ცნობილი აუტოფაგიის როლის შესახებ GO-ს დაწყებასა და პროგრესირებაში.ამ კვლევის მიზანია გამოიკვლიოს აუტოფაგიის როლი GO-ს პათოგენეზში. გაანალიზდა ორბიტალური ცხიმოვანი/შემაერთებელი ქსოვილის ექსპლანტები GO-ით დაავადებული პაციენტებიდან და ნორმალური სუბიექტებიდან, ასევე იზოლირებული ორბიტალური ფიბრობლასტები.ადიპოგენეზი ინდუცირებული იყო დიფერენცირებული საშუალების გამოყენებით წყალბადის ზეჟანგით ან მის გარეშე, ხოლო აუტოფაგია მანიპულირებული იყო ბაფილომიცინის A1 და Atg5-ზე დამიზნებული მოკლე თმის რნმ-ით (shRNA).ავტოფაგოსომები გამოვლინდა ელექტრონული მიკროსკოპით.აუტოფაგიასთან დაკავშირებული გენების გამოხატულება და ადიპოგენეზთან დაკავშირებული ტრანსკრიფციის ფაქტორები გაანალიზებული იყო რეალურ დროში საპირისპირო ტრანსკრიფცია-პოლიმერაზული ჯაჭვური რეაქციით და/ან Western blot ანალიზით.ლიპიდური წვეთების დაგროვება გამოკვლეული იყო Oil Red O შეღებვით. აუტოფაგიური ვაკუოლები უფრო უხვი იყო GO უჯრედებში, ვიდრე არა-GO უჯრედებში (p<0.05).ავტოფაგიასთან დაკავშირებული გენების გამოხატულება მნიშვნელოვნად მაღალი იყო GO ქსოვილებში და უჯრედებში, ვიდრე მათ არა-GO კოლეგებში, შესაბამისად.ინტერლეუკინ-1β გაზარდა LC3-II, p62 და Atg7 პროტეინი GO უჯრედებში.აუტოფაგოსომის დაგროვება ნაჩვენები იყო ადიპოგენეზის მე-4 დღეს და შემცირდა მე-10 დღისთვის, ლიპიდური წვეთების წარმოქმნასთან ერთად.LC3 და p62 ცილების ექსპრესია გაიზარდა დიფერენციაციის შემდეგ 48 საათის განმავლობაში და თანდათან შემცირდა 4-დან 10 დღემდე. ბაფილომიცინით A1 მკურნალობა და Atg5 დაშლა shRNA-თ თრგუნავდა ლიპიდური წვეთების დაგროვებას და თრგუნავდა ადიპოგენური მარკერების ექსპრესიას. აუტოფაგია გაიზარდა GO ქსოვილსა და უჯრედებში შედარებით. არასამთავრობო GO ქსოვილი და უჯრედები, რაც ვარაუდობს, რომ აუტოფაგია თამაშობს როლს GO პათოგენეზში.აუტოფაგიის მანიპულირება შეიძლება იყოს GO-ს თერაპიული სამიზნე.