X-GAL CAS:7240-90-6 98% თეთრიდან მოთეთრო კრისტალური ფხვნილი
კატალოგის ნომერი | XD90008 |
Პროდუქტის სახელი | X-Gal (5-ბრომო-4-ქლორო-3-ინდოლილ-ბეტა-D-გალაქტოპირანოზიდი) |
CAS | 7240-90-6 |
Მოლეკულური ფორმულა | C14H15BrClNO6 |
Მოლეკულური წონა | 408.63 |
შენახვის დეტალები | -2-დან -6 °C-მდე |
ჰარმონიზებული სატარიფო კოდექსი | 29400000 |
პროდუქტის სპეციფიკაცია
ხსნარის გარეგნობა | გამჭვირვალე, უფერო ღია ყვითელი ხსნარი (50 მგ/მლ DMF:MeOH, 1:1) |
სპეციფიკური ოპტიკური როტაცია | -61,5 +/- 1 |
გარეგნობა | თეთრიდან მოთეთრო კრისტალური ფხვნილი |
სისუფთავის HPLC | მინ 99% |
ხსნადობა (5% DMF-ში) | ხსნადი (5% w/v, DMF) |
წყალი KF | მაქსიმუმ 1% |
ანალიზი (HPLC უწყლო ბაზაზე) | მინ. 98% w/w |
X-gal-ის გამოყენება
X-gal (ასევე შემოკლებით BCIG 5-ბრომო-4-ქლორო-3-ინდოლილ-β-D-გალაქტოპირანოზიდად) არის ორგანული ნაერთი, რომელიც შედგება გალაქტოზისგან, რომელიც დაკავშირებულია ჩანაცვლებულ ინდოლთან.ნაერთი სინთეზირებული იქნა ჯერომ ჰორვიცისა და მისი თანამშრომლების მიერ 1964 წელს. ფორმალური ქიმიური სახელი ხშირად მცირდება ნაკლებად ზუსტი, მაგრამ ასევე ნაკლებად რთული ფრაზებით, როგორიცაა ბრომოქლოროინდოქსილ გალაქტოზიდი.ინდოქსილის X შეიძლება იყოს X-ის წყარო X-gal შეკუმშვაში.X-gal ხშირად გამოიყენება მოლეკულურ ბიოლოგიაში ფერმენტის, β-გალაქტოზიდაზას არსებობის შესამოწმებლად მისი ჩვეულებრივი სამიზნის, β-გალაქტოზიდის ადგილას.იგი ასევე გამოიყენება ამ ფერმენტის აქტივობის გამოსავლენად ჰისტოქიმიასა და ბაქტერიოლოგიაში.X-gal არის ერთ-ერთი მრავალი ინდოქსილ გლიკოზიდიდან და ეთერიდან, რომლებიც ფერმენტებით კატალიზებული ჰიდროლიზის შედეგად წარმოქმნიან უხსნად ცისფერ ნაერთებს, როგორიცაა ინდიგო საღებავი.
X-gal არის ლაქტოზის ანალოგი და, შესაბამისად, შეიძლება იყოს ჰიდროლიზებული β-გალაქტოზიდაზას ფერმენტის მიერ, რომელიც წყვეტს β-გლიკოზიდურ კავშირს D-ლაქტოზაში.X-gal, როდესაც იშლება β-გალაქტოზიდაზათ, იძლევა გალაქტოზას და 5-ბრომო-4-ქლორო-3-ჰიდროქსიინდოლს - 1. ეს უკანასკნელი შემდეგ სპონტანურად დიმერიზდება და იჟანგება 5,5'-დიბრომო-4,4'-დიქლოროდ. -ინდიგო - 2, ინტენსიურად ლურჯი პროდუქტი, რომელიც უხსნადია.X-gal თავისთავად უფეროა, ამიტომ ლურჯი ფერის პროდუქტის არსებობა შეიძლება გამოყენებულ იქნას როგორც ტესტი აქტიური β-გალაქტოზიდაზას არსებობისთვის.ეს ასევე საშუალებას იძლევა ბაქტერიული β-გალაქტოზიდაზა (ე.წ. lacZ) გამოიყენოს როგორც რეპორტიორი სხვადასხვა აპლიკაციებში.
ორ ჰიბრიდულ ანალიზში, β-გალაქტოზიდაზა შეიძლება გამოყენებულ იქნეს როგორც მომხსენებელი პროტეინის იდენტიფიცირებისთვის, რომლებიც ურთიერთქმედებენ ერთმანეთთან.ამ მეთოდით, გენომის ბიბლიოთეკები შეიძლება შემოწმდეს პროტეინის ურთიერთქმედებისთვის საფუარის ან ბაქტერიული სისტემის გამოყენებით.სადაც სკრინინგის პროტეინებს შორის წარმატებული ურთიერთქმედებაა, ეს გამოიწვევს აქტივაციის დომენის პრომოტორთან დაკავშირებას.თუ პრომოტორი დაკავშირებულია lacZ გენთან, β-გალაქტოზიდაზას გამომუშავება, რომელიც იწვევს ცისფერი პიგმენტური კოლონიების წარმოქმნას X-gal-ის თანდასწრებით, მაშასადამე, მიუთითებს წარმატებულ ურთიერთქმედებაზე ცილებს შორის.ეს ტექნიკა შეიძლება შემოიფარგლოს 106-ზე ნაკლები ზომის ბიბლიოთეკების სკრინინგით. X-gal-ის წარმატებული გაყოფა ასევე ქმნის შესამჩნევად უსიამოვნო სუნს ინდოლის აორთქლების გამო.
ვინაიდან X-gal თავისთავად უფეროა, ლურჯი ფერის პროდუქტის არსებობა შეიძლება გამოყენებულ იქნას როგორც ტესტი აქტიური β-გალაქტოზიდაზას არსებობისთვის.
აქტიური ფერმენტის ეს მარტივი იდენტიფიკაცია საშუალებას აძლევს βგალაქტოზიდაზას გენს (lacZ გენი) გამოიყენოს როგორც რეპორტიორი გენი სხვადასხვა აპლიკაციებში.