პროდუქტები

ცილის ფოსფორილირება არეგულირებს მრავალფეროვან უჯრედულ ფუნქციებს და მნიშვნელოვან როლს ასრულებს მცენარეების ადრეულ განვითარებაში.არაბიდოპსისის ნერგებში ცილის ფოსფორილირების წინა გამოკვლევების შესავსებად და გასაფართოვებლად, ჩვენ გამოვიყენეთ ალტერნატიული მიდგომა, რომელიც აერთიანებს ცილის ექსტრაქციას არადენატურირების პირობებში და იმობილიზებული მეტა-იონის აფინურობის ქრომატოგრაფიასთან (IMAC) ხელუხლებელი ფოსფოპროტეინების გამდიდრებასთან Rubisco-დან ამოწურულ ექსტრაქტებში, რასაც მოჰყვება იდენტიფიკაცია. ორგანზომილებიანი გელის ელექტროფორეზის (2-DE) და თხევადი ქრომატოგრაფიულ-ტანდემური მასის სპექტრომეტრიის (LC-MS/MS) გამოყენებით.გელის ტრიპსინის მონელებამ და შერჩეული გელის ლაქების ანალიზმა გამოავლინა 144 ფოსფორილირებული პეპტიდი და ნარჩენი, რომელთაგან მხოლოდ 18 ფოსფოპეპტიდი და 8 ფოსფოზიტი იქნა ნაპოვნი PhosPhAt 4.0 და P3DB Arabidopsis thaliana ფოსფორილირების ადგილის მონაცემთა ბაზაში.82 იდენტიფიცირებული ფოსფოპროტეინიდან ნახევარზე მეტი მონაწილეობდა ნახშირწყლების მეტაბოლიზმში, ფოტოსინთეზში/სუნთქვაში ან ოქსიდაციური სტრესის საპასუხო მექანიზმების sms-ში.ხელუხლებელი ფოსფოპროტეინების გამდიდრება 2-DE და LC-MS/MS-მდე, როგორც ჩანს, აძლიერებს ფოსფორილირებული ტრეონინის და ტიროზინის ნარჩენების გამოვლენას იმ მეთოდებთან შედარებით, რომლებიც იყენებენ პეპტიდის დონის გამდიდრებას, რაც მიუთითებს იმაზე, რომ ეს ორი მიდგომა გარკვეულწილად ავსებს ფოსფორილირების ადგილის დაფარვას.ახალგაზრდა ნერგების შედეგების შედარებამ ადრე მიღებულ არაბიდოპსისის მწიფე ფოთლებისთვის გამოავლინა ხუთი ცილა, რომლებიც განსხვავებულად ფოსფორილირებულია ამ ქსოვილებში, რაც აჩვენებს ამ ტექნიკის პოტენციალს მცენარის განვითარების დროს ცილის ფოსფორილირების დინამიკის გამოსაკვლევად.