პროდუქტები

ღვიძლის ციროზული დაავადებების პათოგენური მოლეკულური გზები, როგორიცაა C ჰეპატიტის ვირუსი (HCV), აუტოიმუნური ჰეპატიტი (AIH) და პირველადი ბილიარული ციროზი (PBC) ცუდად არის დახასიათებული.დაავადების პათოგენეზში ხშირად მნიშვნელოვანია დიფერენციალურად გამოხატული გენები.სუპრესიული სუბტრაქციული ჰიბრიდიზაცია (SSH) არის გენომის ფართო მიდგომა, რომელიც ამდიდრებს დიფერენციალურად გამოხატული mRNA ტრანსკრიპტებს.ჩვენ მიზნად ისახავდა ციროზის დროს გენის დიფერენციალური ექსპრესიის ახალი დაკვირვებების გაკეთებას SSH-ის გამოყენებით, რაოდენობრივი რეალურ დროში უკუ ტრანსკრიპტაზას პოლიმერაზული ჯაჭვური რეაქციით (RT-PCR) კომბინირებული.ღვიძლის ტრანსკრიპტომები HCV ციროზის, AIH ციროზის, PBC და არადაავადებული ღვიძლის ქსოვილის დროს გამოკვლეული იყო SSH-ით.შედეგად მიღებული დამატებითი დნმ (cDNA) კლონები ხელახლა იქნა გამოკვლეული დიფერენციალური ექსპრესიისთვის წერტილოვანი ჰიბრიდიზაციის გზით და შემდეგ დახარისხდა.შერჩეული გენის ექსპრესია რაოდენობრივად იქნა შეფასებული რეალურ დროში RT-PCR-ით.SSH-ის შემდეგ, 694 კლონი ხელახლა იქნა გამოკვლეული გენის დიფერენციალური ექსპრესიისთვის, რომელთაგან 145 იყო დახარისხებული და აღმოჩნდა, რომ მომდინარეობს 89 სხვადასხვა გენიდან.შვიდი კლონი იყო ჰომოლოგიური მხოლოდ გამოხატული თანმიმდევრობის ტეგის (EST) თანმიმდევრობით, რომლებიც აკოდირებენ გენებს, რომლებსაც არ აქვთ ცნობილი ფუნქცია.ოთხი გენის რეგულირებული გამოხატულება დადასტურდა რეალურ დროში RT-PCR-ით: ტრანსმემბრანული 4 სუპეროჯახის წევრი 3 (ტეტრასპანინი CO-029) ციროზის ყველა ფორმაში, ზღარბის ურთიერთქმედება ცილა (HIP) AIH ციროზში და ქიტინაზა 3-მსგავსი-1 (HC gp-39 ან ykl-40) და არგინინ-გლუტამინის მჟავის განმეორება (RERE) HCV ციროზის დროს.RERE გენის პოლიმორფიზმი და შერწყმის ვარიანტები დაფიქსირდა ყველა გამოკვლეულ ქსოვილში.ტეტრასპანინის CO-029 ამაღლებული რეგულირება ძირითადად ლოკალიზებულია ნაღვლის სადინარების უჯრედებზე.დასასრულს, ადამიანის ციროზში დიფერენციალური გენის ექსპრესიის ახალი დაკვირვებები განხორციელდა SSH-ის გამოყენებით, როგორც პირველადი აღმოჩენის ინსტრუმენტი.კერძოდ, RERE გენის და მისი პროდუქტების შემდგომი კვლევები HCV-თან ასოცირებულ ღვიძლის დაავადებაში გამართლებულია.